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Cosa si vede al microscopio · Sangue
Il sangue al microscopio: globuli rossi, globuli bianchi e piastrine
Una goccia strisciata e colorata su un vetrino portaoggetti. Scorri verso il basso per osservarla ingrandimento dopo ingrandimento con un microscopio reale: scegli il modello, la luce e la tecnica nel pannello.
Il campo, la risoluzione e gli ingrandimenti provengono dalla scheda tecnica di ogni strumento.
40×: scegliere dove guardare
Con l'obiettivo 4× il campo misura qualche millimetro. Serve a percorrere lo striscio e a cercare la zona in cui le cellule non si ammassano. Ogni globulo rosso è appena un puntino.
100×: migliaia di puntini
Si distinguono già puntini separati: ognuno è un globulo rosso. È l'ingrandimento per percorrere il campione, non ancora per vederne la forma.
400×: dischi con il centro chiaro
I globuli rossi sono ormai dischi e se ne intuisce il centro più chiaro. I globuli bianchi risaltano perché il loro nucleo si colora di viola. È l'ingrandimento tipico per contare le cellule.
1000× con olio a immersione
Si vede la forma: il centro pallido del globulo rosso, i lobi del nucleo del neutrofilo e le piastrine, molto più piccole.
Prova il campo scuro o il contrasto di fase nel pannello: cambia completamente ciò che si vede.
Perché il centro appare più chiaro
Il globulo rosso è un disco incavato su entrambe le facce: circa 2,6 µm di spessore sul bordo e 0,8 µm al centro. Al centro passa più luce ed è per questo che appare pallido.
Forma: Evans e Fung (1972). Questa vista laterale non la fornisce il microscopio, che vede un solo piano.
Quale microscopio ti serve per vedere questo?
Per il sangue serve un obiettivo 100× a immersione in olio. A 400× si contano le cellule; a 1000× se ne studia la forma.
Quale microscopio mi serve?Domande frequenti
Quale ingrandimento serve per vedere i globuli rossi?
Si distinguono come puntini a 100× e come dischi a 400×. Per vedere la loro forma e quella dei globuli bianchi si usa il 1000× con un obiettivo a immersione in olio.
Perché il globulo rosso ha il centro più chiaro?
Perché è un disco incavato su entrambe le facce: è più sottile al centro che sul bordo, e al centro passa più luce.
Che cos'è l'olio a immersione?
Un olio che si mette tra il campione e l'obiettivo 100×. Permette un'apertura numerica maggiore di 1 e, con essa, di vedere dettagli di qualche decimo di micron.
Si può osservare il sangue in campo scuro?
Sì: con un condensatore per campo scuro a specchi (cardioide) e un obiettivo 100× a olio con iride, i globuli brillano su sfondo nero. È una configurazione di serie in alcuni microscopi biologici.
Come è fatta questa simulazione
Non è una fotografia: è un modello calcolato. Ingrandimenti, campo e risoluzione provengono dalla scheda tecnica di ogni microscopio; le misure del campione, dalle fonti citate qui sotto.
| Cosa | Come si calcola | Cosa c'è di approssimato |
|---|---|---|
| Ingrandimento e campo | Ingrandimento = oculare × obiettivo. Campo = numero di campo dell'oculare ÷ ingrandimento dell'obiettivo. | Esatto secondo la scheda. Alcune schede descrivono la serie: la dotazione concreta di obiettivi è ancora da confermare modello per modello. |
| Risoluzione | Criterio di Rayleigh: 0,61 · λ / A.N., con λ = 0,55 µm. | Valore teorico, con il condensatore ben regolato. |
| Ingrandimento utile | Tra 500 e 1000 volte l'apertura numerica. | Oltre, l'immagine si ingrandisce senza mostrare più dettagli. |
| Forma del globulo rosso | Equazione di Evans e Fung: spessore totale h(ρ) = √(1−ρ²)·(C0 + C2ρ² + C4ρ⁴), con R0 = 3,91 µm, C0 = 0,81 µm, C2 = 7,83 µm e C4 = −4,39 µm. Dà 7,82 µm di diametro e circa 2,6 µm di spessore massimo. | Variazione di dimensione del ±4,5 %, scelta da noi (l'intervallo abituale è 7,5–8,7 µm). |
| Campo chiaro | La luce si attenua in base allo spessore (Beer-Lambert): per questo il centro risulta più chiaro. | Tonalità della colorazione scelta a occhio, tendente al rosa del Giemsa. |
| Contrasto di fase | Luminosità in base allo sfasamento: indice del globulo rosso ≈ 1,40 contro ≈ 1,35 del plasma. | Alone e intensità: approssimazione qualitativa. |
| Campo scuro | Brillano i bordi e le pendenze, che deviano la luce. È una tecnica comune per osservare il sangue: Euromex presenta il suo iScope in campo scuro come ideale per l'analisi del sangue vivo. | Intensità approssimativa. Gli strumenti del negozio con campo scuro di serie lo offrono a 1000×. |
| Polarizzazione | Brilla solo ciò che è birifrangente; il tavolino ruota. | Il globulo rosso lo è pochissimo (circa 3,5 nm di ritardo): con un microscopio da aula non si apprezza. |
| Proporzioni | Una piastrina ogni ~33 globuli rossi (5,4 milioni contro ~160.000 per µL). Neutrofilo di 11 µm con 4 lobi. | Il neutrofilo è messo apposta vicino al centro; nel sangue normale c'è nell'ordine di un globulo bianco ogni 500–1000 rossi. |
Fonti
- Schede tecniche dei microscopi di Letscopes.
- Evans E, Fung YC. Improved measurements of the erythrocyte geometry. Microvascular Research 1972;4(4):335-347. PubMed 4635577.
- Parametri dell'equazione, riportati in Pozrikidis e Dimitrakopoulos, Biophysical Journal 2010 (PDF).
- Dimensioni, conteggi e colori delle cellule del sangue: Anatomy & Physiology II (Lumen) e Erythrocytes (Lumen).
- Indice di rifrazione: Frontiers in Photonics 2025. Birifrangenza: PubMed 25396712.
- Campo scuro di serie (condensatore cardioide e obiettivo S100× a olio con iride, 1000×): Euromex, iScope darkfield e bScope darkfield.
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